叶酸在临床上主要用于巨幼红细胞性贫血。服用后主要在空肠通过主动转运而吸收，大剂量时，部分通过扩散被吸收。由于它和VitB12在治疗巨幼红细胞性贫血上可以互相辅助，所以二者经常被医师们伍用，但二者不能互相代替，例如叶酸对恶性贫血，只能使血象好转，不能改善神经系统症状，因此最多起辅助作用，而不能完全代替VitB12治疗此症。

    但对孕妇及婴幼儿型巨幼红细胞贫血，则仅用叶酸有效。VitB12疗效不佳。

    对叶酸拮抗剂引起的巨幼红细胞贫血，须用甲酰四氢叶酸钙治疗。因为拮抗剂竞争性地抑制二氢叶酸还原酶，叶酸在体内不能转变为四氢叶酸，从而阻止了叶酸的利用。对酒精中毒及长期羊奶喂养的婴幼儿应加服叶酸。对神经系统症状突出的巨幼红细胞性贫血应该慎用或不用叶酸，因为它可能加速，加重或者促发神经系统症状。它还可以用于铅、苯中毒、脂痢等症。

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